L'histoire du célèbre tableau est racontée depuis sa création au XVIe siècle jusqu'à son installation au Louvre, son vol puis sa réintégration dans la pièce où sept millions de spectateurs viennent chaque année l'admirer. Des pages documentaires sur les techniques de peinture, la vie de Léonard de Vinci et les nombreux artistes inspirés par la Joconde dans le monde entier complètent le récit.